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了解IVC系統(tǒng)和超凈工作臺的操作過程實驗詳解

通過對IVC系統(tǒng)實驗，了解超凈工作臺的使用原理及操作過程，所謂實踐出真知，只有通過這樣才能增長學(xué)生們的見識及學(xué)習(xí)能力。

【目的與要求】

了解IVC系統(tǒng)和超凈工作臺的原理結(jié)構(gòu)、維護(hù)、操作程序和注意事項。

【儀器與材料】

IVC、超凈工作臺、一次性手套、口罩。

【步驟】

一、師講述IVC系統(tǒng)和超凈工作臺的原理結(jié)構(gòu)、維護(hù)、操作程序和注意事項。

二、學(xué)生在教師指導(dǎo)下進(jìn)行各項基本操作。

【內(nèi)容】

一、原理和結(jié)構(gòu)

IVC籠盒由耐高溫（至少能耐150～160℃高溫以上）的透明塑料材料制成，一套籠盒由上蓋、底盒、食槽、水槽、鎖緊扣、進(jìn)出風(fēng)口組件、硅橡膠密封墊圈等組成有的上蓋上還有一個稱之為生命之窗的空氣過濾網(wǎng)。獨立通風(fēng)籠盒是IVC設(shè)備的關(guān)鍵所在，它要具有一定的密閉性，能防止盒外空氣的進(jìn)入，以減少可能的感染來源，又要能讓潔凈空氣流暢進(jìn)入，并在盒內(nèi)形成良好的氣流動或擴(kuò)散，與盒內(nèi)氣體混合并把籠盒內(nèi)的廢氣排出。籠盒一般有兩種基本形式，而且大多申請了專利保護(hù)。一種為籠盒的通排氣是閥門開閉式，即上架時打開，取下時自動關(guān)閉。閥門有照相機(jī)快門式和單片彈簧開關(guān)式等。另一種為盒內(nèi)終端過濾保護(hù)式。過濾膜的形式有圓筒狀和平板狀兩種。過濾膜大多為亞高效或高效過濾材料制成。

二、操作程序

1．IVC操作使用前的準(zhǔn)備工作

　　（1）開啟超凈工作臺風(fēng)機(jī)，凈化臺內(nèi)環(huán)境。打開工作燈達(dá)到工作照度。

　　（2）檢查超凈工臺中準(zhǔn)備的各種滅菌飼養(yǎng)和實驗物品（飼料、墊料、酸化水及實驗用物）是否齊全。若需更換籠盒。檢查滅菌籠盒準(zhǔn)備情況，并用不銹鋼推車移至超凈臺移門邊。

　　（3）檢查噴霧器噴灑效果及超凈臺內(nèi)外擦抹用的藥液是否已配置好。

　　（4）打開房間內(nèi)排風(fēng)系統(tǒng)。排除打開籠盒時逸出的有味氣體。

　　（5）檢查IVC機(jī)組各種表頭指針及目視各籠盒內(nèi)的動物情況，估測IVC運行情況。

　　（6）記錄影響實驗動物繁殖、生長、發(fā)育的主要環(huán)境參數(shù)，如溫度、相對濕度、日溫差、籠盒內(nèi)外壓差等。

2．IVC操作使用程序及規(guī)范

　　（1）人員帶好一次性口罩、帽子及醫(yī)用乳膠手套。（注意：帶手套前應(yīng)洗凈手及指甲，若指甲太長應(yīng)適當(dāng)修剪，以免戳破醫(yī)用乳膠手套）。

　　（2）用雙手輕輕抬起IVC籠盒外端，沿籠架擱擋向外移出籠盒，放在超凈工作臺旁的不銹鋼小推車上。

　　（3）用藥液噴霧器充分噴灑雙手手套外表及IVC籠盒的外面，消毒滅菌并沾粘住表面的塵埃，防止進(jìn)入超凈臺時被層流氣體吹揚。也可用帶手套的雙手浸入藥液容器中，撈起并擰干藥液毛巾，擦干手套外液滴，同時擦一下籠盒的外表。

　　（4）打開超凈工作臺移門（高度只要能使籠盒進(jìn)入即可），把籠盒移入超凈工作臺。

　　（5）適當(dāng)拉下超凈工作臺移門（高度只要操作者二手在臺中活動自如即可）。打開IVC籠盒蓋底之間的緊固扣并打開籠蓋。側(cè)臥放在一邊。　

（6）目視籠盒中動物的生活情況，作出添料、加水、換盒、幼仔斷乳分窩及動物實驗的決定，并實施：

①添加飼料：嚙齒類動物為自由采食（因?qū)嶒炐枰蘖抗┙o除外），采食時間大多在夜晚，白天目視盒中應(yīng)富余供給。添加時，用小剪刀剪開輻照料鋁泊包裝，加滿料斗即可，根據(jù)動物的數(shù)量，一般加一次料可維持三天左右。

②添加飲用水：水是動物生存的重要營養(yǎng)要素：動物不能斷食，更不能斷水。嚙齒類動物的飲水量不大，一瓶250ml的水對4～8只小鼠，維持三天足足有余。斷水的主要原因是水瓶或飲水口漏水，防止斷水的關(guān)鍵是選擇優(yōu)質(zhì)水瓶和灌水后瓶蓋的擰緊。打開籠盒。取出水瓶、觀察水瓶中剩余水的水質(zhì)是否混濁，如發(fā)現(xiàn)混濁，立即更換水瓶。換上一瓶已清洗過水瓶并經(jīng)滅菌的飲用水。若剩余水清澈，未發(fā)現(xiàn)有污染的情況。則可使用原飲水瓶，在超凈臺中直接通過龍頭灌裝超濾酸化水，繼續(xù)使用。灌裝畢，關(guān)緊龍頭閥門。防止泄漏，腐蝕超凈工作臺臺面。

③更換籠盒：先將滅菌過的籠盒移入超凈工作臺中，放入適量滅菌墊料，然后打開需換籠盒的金屬網(wǎng)蓋，用消毒滅菌過的大鑷子（鑷頭最好套上一段乳膠管），挾住動物尾巴。把動物移至新的籠盒，蓋上金屬網(wǎng)蓋。加足飼料及飲用水，蓋上盒蓋，扣上緊固扣最后把原籠盒上的動物卡片移插至新的籠盒上。并把換下的籠盒放入專用塑料袋中，扎緊集中外運處理。當(dāng)然，更換籠盒也可只換籠盒底盒，不換盒蓋，這要視籠盒的使用情況而定。更換籠盒時，有時也可順便檢查一下盒蓋上的終端過濾器情況，并作適當(dāng)處理（互相對換，換膜等）。

④幼仔斷乳分窩：方法同更換籠盒。

⑤動物實驗：按上述方法，打開籠盒蓋，在超凈工作臺內(nèi)再次對帶有乳膠手套的雙手用75%濃度的酒精棉球擦試消毒滅菌，從籠盒中取出動物，放在小動物手術(shù)臺上，麻醉、捆綁四肢、手術(shù)、止血、縫合，或灌藥、注射、采血，或處死、解剖、取標(biāo)本等。實驗完畢，順便檢查一下動物飼料、飲水及籠盒的污染情況。該添就添，該加則加，該換就換，一切視情況而定。

⑥做完超凈工作臺中的飼養(yǎng)和實驗工作，蓋好籠盒，打開超凈工作臺的移門，取出籠盒，放在IVC籠架上原位（如需更換位置，則另作別論），對準(zhǔn)籠架進(jìn)出風(fēng)口，沿籠架擱擋，輕輕推入，接口后在籠架固定鈕內(nèi)放下即可。

　　⑦依此操作第二個籠盒或做下一個組合的動物實驗。

三、注意事項

1、IVC系統(tǒng)安裝的房間必須符合普通級環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)。

2、房間配有功率適當(dāng)?shù)摹⒛苷{(diào)控溫濕度的空調(diào)設(shè)備。

3、應(yīng)有換氣裝置和供系統(tǒng)使用的排氣管道。

4、配備“萬級”專用超凈臺一臺及噴霧專用噴槍一把。

5、IVC動物實驗室使用的實驗動物，必須來自有生產(chǎn)許可證的實驗動物供應(yīng)單位，并附有相應(yīng)級別的合格證書。在引進(jìn)IVC動物實驗室前，先應(yīng)檢查核對動物運輸盒上的各種標(biāo)志（動物品種、品系、規(guī)格、數(shù)量等），并檢查包裝箱及過濾膜有否破損，確認(rèn)一切正確無損，方可移至IVC動物實驗室。

6、實驗器材及小型儀器進(jìn)入屏障系統(tǒng)IVC室，按屏障系統(tǒng)物品進(jìn)入程序規(guī)范進(jìn)行。

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